[생화학실험]PCR & DNA Gel Electrophoresis

All my Life > 문서박스 > Bio Chem. | 2008/04/23

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저작시기 : 2008/04
추천독자 : 대학생,생화학실험을 수강..

카테고리 : 리포트 > 자연과학
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소개글

PCR을 이용하여 DNA를 증폭한 후 Agarose gel electrophoresis를 통해 DNA를 분리하는 실험입니다. PCR의 원리를 이해하고 agaross gel을 이용하여 전기영동을 해보므로써 PCR 실험에 대한 기본과정을 파악할 수 있습니다.

실험 이론, 실험 방법 속에 결과에 대한 내용 및 어떻게 실험이 진행되는지 자세히 적혀있으므로 결과는 굳이 따로 쓰지 않았습니다!

■실 험 목 적 1
■실 험 이 론 1
■실 험 방 법 9
■주 의 사 항 13
■참 고 자 료 15
■참 고 문 헌 16

본문내용

■ 실험목적
• PCR을 이용하여 DNA를 증폭한 후 Agarose gel electrophoresis를 통해 DNA를 분리한다.
• PCR의 원리를 이해하고 전기영동에 이용된 시약의 특성을 이해한다.

■ 실험 이론
• PCR(polymerase chain reaction)
◦ 중합효소 연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR)은 1983년 Kary Mullis에 의해 고안 되었는데 이 는 80년대 제한효소의 발견에 의한 Gene Cloning법에 이어 90년대를 화려 하게 장식한 생명공학 연구 의 혁명적인 사건입니다.
◦ 특정 DNA 부위를 특이적으로 반복 합성하여 시험관내에서 원하는 DNA 분자를 증폭시키는 방법으로서, 아주 적은 양의 DNA를 이용하여 많은 양의 DNA 합성이 가능하므로 분자 생물학적으로 제한효소의 발견만큼 획기적인 것이라고 할 수 있다. 즉 genomic DNA와 같은 아주 큰 DNA로부터 원하는 DNA 부분만을 선택적으로 증폭시킨 후 일반적으로 사용되는 agarose gel이나 polyacrylamide gel 상에서 뚜렷하게 보이는 band로 가시화할 수가 있다. 중합효소 연쇄반응을 통하여 in vitro상에서 특정 부위의 DNA를 105∼108배까지 수 시간내에 증폭시킬 수 있으며, 이렇게 증폭된 DNA를 다음과 같이 여러가지 실험에 이용할 수 있고, 실험 결과를 토대로 여러 의학적인 연구에 응용할 수가 있다.
◦ PCR은 이제 분자생물학 전반에 널리 관여하고 있어서 PCR이 적용되지 않는 실험은 생각하기 어려울 정도가 되어서 매일 같이 PCR 관련 기법이 쏟아져 나오고 있어 PCR 응용분야가 더욱 더 확대되리라 생각된다
• PCR의 소개
◦ 유전자를 분석하고 연구하는데 있어서 가장 큰 문제점은 복잡한 전체 genome중에 연구 하고자 하는 유전자가 희귀하다는 것인데, PCR은 특정 DNA Sequence의 copy수를 기하 급수적으로 증폭시킬 수 있다는 점이다. 이러한 PCR을 소개하기에 앞서서 간단히 분자 생물학적인 사항을 review해 보면 먼저 DNA의 구성을 살펴보면

참고자료

• 생물학실험, 김선명, 1987, 아카데미서적
• 생화학 실험서, 김영희, 2004, 아카데미서적
• 실험생화학 한국생화학회, 1997, 탐구당, p342

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